緩衝液レシピ計算ツール
Henderson-Hasselbalch式(pH = pKa + log([A⁻]/[HA]))を使用して正確な緩衝液レシピを生成する無料ツールです。10種類の緩衝系(Tris-HCl、HEPES、リン酸、酢酸など)から選択し、目標pHと体積を設定すると、正確な質量とストック溶液の体積が算出されます。インタラクティブなSVG pHスケール表示付き。登録不要です。
HEPES緩衝液、pH 7.4
| 成分 | 濃度 (mM) | 質量 (g) | 1M ストック (mL) |
|---|---|---|---|
| HEPES | 29.27 | 6.976 | 29.27 |
| HEPES sodium salt | 20.73 | 5.395 | 20.73 |
酸型と塩基型を最終体積の約80%の脱イオン水に溶解してください。必要に応じてHClまたはNaOHでpHを調整します。脱イオン水で最終体積にメスアップしてください。必要に応じてオートクレーブまたはフィルター滅菌してください。
Henderson-Hasselbalchの公式
pH = pKa + log([A⁻]/[HA])
[A⁻]/[HA] = 10^(pH - pKa)
[HA] = C_total / (1 + ratio)
[A⁻] = C_total - [HA]
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緩衝液レシピ計算ツールとは?
緩衝液レシピ計算ツールは、特定のpHの緩衝液を調製するために必要な酸と共役塩基の正確な量を算出するツールです。Henderson-Hasselbalch式:pH = pKa + log([A⁻]/[HA])を使用します。ここで、pKaは酸解離定数、[A⁻]は共役塩基の濃度、[HA]は弱酸の濃度です。緩衝液はpHの変動を抑え、生物実験、細胞培養、酵素アッセイ、電気泳動、クロマトグラフィーに不可欠です。このツールはpH 3.0~11.1をカバーする10種類の一般的な緩衝系に対応しており、生物学的緩衝液(HEPES、MOPS、Tris、MES)と化学的緩衝液(酢酸、クエン酸、リン酸)を含みます。
この計算ツールの使い方
- 目標pHをカバーする緩衝系を選択してください(各緩衝系にはpKaと有効範囲が表示されます)
- 目標pHの値を入力してください
- 希望する緩衝液濃度 (mM) と総量 (mL) を設定してください
- レシピを確認してください:酸型と塩基型の質量 (g)、または1Mストック溶液の体積 (mL)
- 調製手順に従って、溶解、pH調整、メスアップを行ってください
よくある質問
実験に適した緩衝系はどう選びますか?
目標pHの±1.0 pH単位以内にpKaを持つ緩衝液を選択してください。この有効緩衝範囲内で、緩衝液はpH変動に最も効果的に抵抗します。pH 7.4での生物学的実験には、HEPES(pKa 7.55)またはリン酸(pKa 7.2)が一般的です。Tris系緩衝液では、pKa(8.06)が温度1℃あたり約0.03低下することに注意してください。
Henderson-Hasselbalch式とは何ですか?
Henderson-Hasselbalch式(pH = pKa + log([A⁻]/[HA]))は、緩衝液のpHを弱酸のpKaと共役塩基・弱酸の濃度比に関連付ける式です。pH = pKaのとき比率は1:1となり、緩衝能が最大になります。この式は緩衝液の有効範囲(pKa ± 1)内で正確です。
緩衝液が有効範囲外になるのはなぜですか?
緩衝液はpKaの±1.0 pH単位以内で最も効果的に機能します。この範囲外では酸と塩基の比率が極端になり(10:1以上または1:10以下)、溶液のpH変動抵抗能力が失われます。目標pHが範囲外の場合は、pKaがより近い別の緩衝系を選択してください。
レシピ計算後の緩衝液の調製方法は?
計算された量の酸型と塩基型を、最終体積の約80%の脱イオン水に溶解します。校正済みのpHメーターでpHを確認し、HClまたはNaOHを少量ずつ加えて微調整します。その後、脱イオン水で最終目標体積にメスアップします。緩衝液の耐熱性に応じて、オートクレーブ(121℃、15分)またはフィルター滅菌(0.22 µm)を行ってください。